山楂提取物调节血t脂作用的实验研究
核心提示： 山楂为蔷薇科植物山楂Crateagus pinnatifida．的干燥成熟果实。经临床研究证实，山楂能够显著地降低血脂和胆固醇、抗脂质过氧化，有效地防治动脉粥样硬化。本实验采用大鼠高脂血症模型，研究山楂提取物对试验性高脂血症
山楂为蔷薇科植物山楂Crateagus pinnatifida．的干燥成熟果实。经临床研究证实，山楂能够显著地降低血脂和胆固醇、抗脂质过氧化，有效地防治动脉粥样硬化。本实验采用大鼠高脂血症模型，研究山楂提取物对试验性高脂血症大鼠的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白．胆固醇(LDL-C)的影响，为山楂的开发利用提供科学依据。
材 料
1 动物
Wistar大鼠60只，SPF级，体重(150～200)g，雌雄各半，由安徽省全椒县翔飞养殖场专业合作社提供。实验动物生产许可证：SCXK(苏)2008—0004；合格证书：劳动(饲)字95001。
2药物与试剂
山楂药材购自上海制药芜湖悦盛药业公司。Tc、TG、LDL-C、LDL-C测定试剂盒均购自上海荣盛生物技术有限公司。
3仪 器
UV 8100 C／T6型紫外分光光度计(莱伯泰科／北京普析通用)，RⅡ型旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司)，XW一80A型漩涡混合器(上海金鹏分析仪器有限公司)，3K15型台式高速冷冻离心机(德国SIGMA公司)。
方 法
1 高脂饲料的配制
参照文献[3]方法，用1％胆固醇、0．12％甲基硫氧嘧啶、0．13％胆盐、7．75％猪油、10％蛋黄粉和81％基础饲料制成高脂饲料。
2 山楂提取物的配制
取山楂100g，用1000m180~C的水浸泡1h，煮沸1．5h，过滤，滤渣加入800ml水再次煮沸1h，过滤，去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪减压浓缩至浸膏备用。使用时加蒸馏水配成所需浓度。
3动物分组、造模及给药方法
将大鼠随机分为正常对照组、模型组、山楂提取物低、中、高剂量组、辛伐他汀(阳性对照)组。大鼠食量按25g天／只计算，正常对照组喂普通饲料，其他各组大鼠喂高脂饲料，连续40天。每天灌胃给药1次，给药体积均为2ml／lOOg体重。空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水；其他各组给予相应的药量：山楂提取物高剂量组(30g／kg)；山楂提取物中剂量组(15g／kg)；山楂提取物低剂量组(7．5g／kg)；辛伐他汀(20mg／kg)。
4指标测定方法
末次喂饲后，禁食12h，腹主动脉取血，分离血清，按照试剂盒测试程序操作，用分光光度计测定血清TC、TG、LDL-C、LDL-C值。
统计方法
计量资料用(x土s)表示，各组间实验数据的比较采用两样本均数的￡检验，数据统计采用SPSSl2．5 forWindows软件处理。
结 果
与正常对照组相比，模型组TC、TG、LDL-C均明显升高，LDL-C明显降低(P<0．01)；与模型组相比，山楂提取物中、高剂量组与辛伐他汀组TC、TG、LDL-C明显降低，LDL-C明显升高(P<O．01或P<0．05)；山楂提取物中、高剂量组与辛伐他汀组比较无明显差异(P>0．05)；山楂提取物低剂量组与辛伐他汀组比较具有明显差异(P<0．01或P<O．05)。
讨 论
高脂血症表现为脂质代谢异常，特别是血浆胆固醇浓度升高可导致动脉粥样硬化，可导致血栓形成和动脉粥样硬化，引发心脑血管疾病。近年来，随着生活水平的提高，我国居民患高脂血症人数不断上升且呈年轻化趋势，故降低血脂是防治心脑血管病的有效措施。 临床研究证实，调脂治疗可减慢动脉粥样硬化发展进程，降低心血管疾病发生率，改善患者预后。
采用高脂饲料喂养法是目前采用较多也是较为理想的建立高脂血症动物模型方法之一，主要优点是人为干扰因素少，接近人类日常的饮食。本实验模型动物血清TC、TG、LDL-C均明显升高，LDL-C明显降低，表明该法所致高脂血症动物模型成功。
本实验结果显示，山楂提取物可降低高脂血症大鼠的血清中TG、LDL-C的水平以及提高LDL-C水平。提示山楂提取物具有明显调节血脂异常的作用，说明其对冠心病和动脉粥样硬化有一定的预防作用，可以制备为辅助降血脂药物，但其作用机理还需进一步研究。
材 料
1 动物
Wistar大鼠60只，SPF级，体重(150～200)g，雌雄各半，由安徽省全椒县翔飞养殖场专业合作社提供。实验动物生产许可证：SCXK(苏)2008—0004；合格证书：劳动(饲)字95001。
2药物与试剂
山楂药材购自上海制药芜湖悦盛药业公司。Tc、TG、LDL-C、LDL-C测定试剂盒均购自上海荣盛生物技术有限公司。
3仪 器
UV 8100 C／T6型紫外分光光度计(莱伯泰科／北京普析通用)，RⅡ型旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司)，XW一80A型漩涡混合器(上海金鹏分析仪器有限公司)，3K15型台式高速冷冻离心机(德国SIGMA公司)。
方 法
1 高脂饲料的配制
参照文献[3]方法，用1％胆固醇、0．12％甲基硫氧嘧啶、0．13％胆盐、7．75％猪油、10％蛋黄粉和81％基础饲料制成高脂饲料。
2 山楂提取物的配制
取山楂100g，用1000m180~C的水浸泡1h，煮沸1．5h，过滤，滤渣加入800ml水再次煮沸1h，过滤，去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪减压浓缩至浸膏备用。使用时加蒸馏水配成所需浓度。
3动物分组、造模及给药方法
将大鼠随机分为正常对照组、模型组、山楂提取物低、中、高剂量组、辛伐他汀(阳性对照)组。大鼠食量按25g天／只计算，正常对照组喂普通饲料，其他各组大鼠喂高脂饲料，连续40天。每天灌胃给药1次，给药体积均为2ml／lOOg体重。空白对照组和模型组给予等体积的生理盐水；其他各组给予相应的药量：山楂提取物高剂量组(30g／kg)；山楂提取物中剂量组(15g／kg)；山楂提取物低剂量组(7．5g／kg)；辛伐他汀(20mg／kg)。
4指标测定方法
末次喂饲后，禁食12h，腹主动脉取血，分离血清，按照试剂盒测试程序操作，用分光光度计测定血清TC、TG、LDL-C、LDL-C值。
统计方法
计量资料用(x土s)表示，各组间实验数据的比较采用两样本均数的￡检验，数据统计采用SPSSl2．5 forWindows软件处理。
结 果
与正常对照组相比，模型组TC、TG、LDL-C均明显升高，LDL-C明显降低(P<0．01)；与模型组相比，山楂提取物中、高剂量组与辛伐他汀组TC、TG、LDL-C明显降低，LDL-C明显升高(P<O．01或P<0．05)；山楂提取物中、高剂量组与辛伐他汀组比较无明显差异(P>0．05)；山楂提取物低剂量组与辛伐他汀组比较具有明显差异(P<0．01或P<O．05)。
讨 论
高脂血症表现为脂质代谢异常，特别是血浆胆固醇浓度升高可导致动脉粥样硬化，可导致血栓形成和动脉粥样硬化，引发心脑血管疾病。近年来，随着生活水平的提高，我国居民患高脂血症人数不断上升且呈年轻化趋势，故降低血脂是防治心脑血管病的有效措施。 临床研究证实，调脂治疗可减慢动脉粥样硬化发展进程，降低心血管疾病发生率，改善患者预后。
采用高脂饲料喂养法是目前采用较多也是较为理想的建立高脂血症动物模型方法之一，主要优点是人为干扰因素少，接近人类日常的饮食。本实验模型动物血清TC、TG、LDL-C均明显升高，LDL-C明显降低，表明该法所致高脂血症动物模型成功。
本实验结果显示，山楂提取物可降低高脂血症大鼠的血清中TG、LDL-C的水平以及提高LDL-C水平。提示山楂提取物具有明显调节血脂异常的作用，说明其对冠心病和动脉粥样硬化有一定的预防作用，可以制备为辅助降血脂药物，但其作用机理还需进一步研究。
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