蛋白质组学在气虚体质研究中的应用

　　以蛋白质组学为代表的后基因组时代的到来，必然使分子生物学经历从局部观走向整体观、从线形思维走向复杂思维的转变。将蛋白质组学引入中医证候分类及证候演变规律的研究，对从分子流行病学水平来探讨中医学与蛋白质组学乃至现代分子生物学研究相结合都是必须的。而蛋白质组学与传统中医药在研究生命科学的思维方法上逐步趋于一致，相互渗透，说明在探讨复杂性生命现象时中西医两种医学相结合的必然性和重要性。目前国内外尚没有将蛋白质组学引人中医体质研究的报道。对于气虚体质，我们有了一定的研究基础，我们设想，将蛋白质组学引入气虚体质研究，能够推动中医体质研究的发展。

1气虚体质研究现状

　　气虚体质是以体质要素中气的虚弱、机体脏腑功能状态低下为主要特征的一种体质状态。许多学者都将气虚体质划为体质类型的一种，如：王琦…将中医体质分为正常质、阴虚质、阳虚质、痰湿质、湿热质、气虚质、瘀血质、气郁质、特异质9型。何裕民等将中国人体质分为强壮型、虚弱型、偏寒型、偏热型、偏湿型、瘀滞型6型。运用流行病学的方法对体质进行聚类分析，聚类结果表明气虚体质是最常见、最基本的病理性体质类型。王莉通过对2967例流行病调查资料的模糊识别分析，发现女性虚弱质(气虚质)明显高于男性。可见在实际人群分布上，气虚体质是一种客观存在的、常见的体质类型。王琦认为气虚体质的特征是：体形胖瘦均有，瘦人为多；毛发不华，面色偏黄或咣白，肤色黄，目光少神，鼻色淡黄，口淡，唇色少华，肢体容易疲乏无力，寒热耐受力差，尤不耐寒，脉象虚缓，舌淡红、边有齿痕，性格一般喜静懒言，食减不化，或喜食甜食，大便正常或有便秘，但不干结，或大便不成形，便后仍觉未尽，小便正常或偏多。匡调元认为气虚体质的特点为：面色咣白，气短懒言，乏力眩晕，心悸健忘，脱肛感，动辄汗出，子宫下坠感，手易麻，月经少，脉细弱无力，舌淡。李东涛对70多种古医籍中气虚的症状体征出现的频率进行了统计，其中少气(或懒言，或短气)占症状表现的46％；倦怠乏力占31％；精神疲倦占10．7％；自汗、头晕、动则气喘等占12．3％；脉象以虚脉类为主。国内外有关气虚体质的基础实验研究甚少，多集中在气虚证的研究上。张惠敏等采用流行病学调研的方法对北京市城区、乡镇、农村人口16岁以上的395人进行气虚体质分布状况的调查，发现气虚体质在成年人群样本中的出现率为19％。崔艳经临床观察发现大多数气虚证患者白细胞总数偏低。陈辉等对气虚证患者免疫功能进行了检测，发现气虚证组患者IgA、IgM、OKT3、 OKT4、OKT8淋巴细胞转化率均值均低于对照组。田道法等对气虚证模型大鼠反义DNA阵列A区基因表达谱特征进行了初步研究，发现A21、A3i表达下调，A6c、A7k表达上调，基因表达谱具有特征性。可见，将基因组学等现代科技手段引入气虚体质的研究是非常有意义的，但是，应用基因组学进行气虚体质的研究尚有一定的局限性。

2蛋白质组学研究特点

　　随着基因组学研究的深入，人们发现基因组学存在着一定的局限性，在这种背景下，上世纪90年代中期，产生了一门以蛋白质组为研究对象，在整体水平上研究细胞内蛋白质的组成及其活动规律的新兴学科——蛋白质组学。当前大量蛋白质组研究课题的开展，使生物医学研究进入后基因组时代(post． genomeera)。蛋白质组学的研究对象不是单一或少数的蛋白，它着重的是全面性和整体性，需要获得体系内所有蛋白质组分的物理、化学及生物学参数，如分子量、等电点、表达量等。蛋白质组学研究的基本步骤有：蛋白质分离、蛋白质鉴定和蛋白质分析。其中关键技术是双向凝胶电泳、质谱分析和生物信息学。蛋白质组学一经出现，就有2种研究策略。一种可称为“竭泽法”，即采用高通量的蛋白质组研究技术分析生物体内尽可能多乃至接近所有的蛋白质，这种观点从大规模、系统性的角度来看待蛋白质组学，也更符合蛋白质组学的本质。但是，由于蛋白质表达随空间和时间不断变化，要分析生物体内所有的蛋白质是一个难以实现的目标。另一种策略可称为“功能法”，即研究不同时期细胞蛋白质组成的变化，如蛋白质在不同环境下的差异表达，以发现有差异的蛋白质种类为主要目标。这种观点更倾向于把蛋白质组学作为研究生命现象的手段和方法。蛋白质组学是对机体、组织或细胞的全部蛋白质的表达和功能模式进行研究。

3    蛋白质组学在中医证候研究中的应用

　　中医证候是一种多基因参与的，处于“络病”状态的症状群。这些症状群之间是通过能表达各自症状的相关基因构成的一个调节网络来维系的。蛋白质组学从整体水平研究蛋白质的表达和功能的方法与中医理论的整体观不谋而合，蛋白质组学研究也是从整体水平上反映了疾病过程中蛋白质表达的动态演变过程，与中医辨证论治的认识方法相似相通，能够为中医药的研究提供良好的实验平台。目前，有许多学者认为将蛋白质组学应用于中医证候的研究是确实可行的，而尚未有将蛋白质组学应用于中医体质研究的报道。蛋白质组学研究与中医药的整体观、辨证观、动态观非常相似，尤其是作为某一阶段病理变化概况的中医的“证”，可能与机体在某一特定环境下所表达的蛋白质组存在内在必然联系。张昱等认为通过对不同中医证候产生前后蛋白质组学的研究来探究中医证候产生的物质基础支配机制，揭示中医证候的科学内涵，能够为中医诊断的客观化提供依据和方法。刘为民等提出证候基因组学、证候蛋白质组学理论，认为通过分子流行病学调查，利用mRNA差异显示法、差异二维蛋白质电泳方法及差异功能蛋白质显示法，综合差异的特异性mRNA、蛋白质等多种分子生物学标志物，从mRNA、蛋白质水平探讨中医证型分类的基因表型、蛋白质表型，收集整理各种“证”的蛋白质组学特异性指标，形成新的“证候病理学”，最终能阐明中医证的实质、辨治及演变规律。申维玺等提出了中医证的本质是细胞内基因诱生性表达的细胞因子，中医证的基本发病机理是由于细胞因子网络功能紊乱的结果；而细胞因子的本质是多肽，即蛋白质组研究的主要内容之一。

4蛋白质组学在气虚体质研究中的应用

        大量研究显示，应用蛋白质组学研究中医证候，是切实可行的，能够揭示中医证候的科学内涵，能够为中医诊断的客观化提供依据和方法。

        气虚体质与气虚证之间既有联系又有区别，气虚体质与气虚证均是一个综合的概括性的概念。中医体质类型与中医证候都是对人体生命现象的描述。中医体质类型是对非病状态下的正常体质与病理体质的归纳。而中医证候是对内外因素互相作用而发病之后，正邪交争所形成的某一阶段表现及机体的反应状态等疾病现象的概括。气虚体质与气虚证均是对机体整体状态的一个描述。应用蛋白质组学研究中医证候，已被证明是科学的。因此，我们设想，将蛋白质组学应用于气虚体质研究，是科学的、完全可行的。

        蛋白质组学技术的应用将帮助寻找和确定中医气虚体质的客观指标，用客观检测指标对中医学概念中的气虚体质做出现代医学的解释，实现中西医学的交汇与融合。将蛋白组学引入中医气虚体质实质研究，可从功能表现的具体形式寻找其物质根源——蛋白质组分，然后针对需要模拟的功能形态进行基因一蛋白质的干预。这样能确保功能模拟的准确性和重复性，提高中医气虚体质实验室研究水平，对中医基础理论研究无疑是巨大的推动。采用蛋白组学技术进行全面、系统的研究，对中医气虚体质的组织和细胞的蛋白质组进行分析，检测蛋白质指纹图谱，进行生物信息学和统计学的比较分析，就可建立气虚体质特定的蛋白质指纹图谱数据库，探索气虚体质一蛋白质组学之间的关系，建立“气虚体质一蛋白质指纹图谱”，相信能为最终揭示气虚体质的重要相关蛋白质特性，气虚体质的蛋白质分子微观辨证、诊断学指标方案，以及气虚体质的动物模型复制研究提供思路并奠定坚实的基础，从而揭示中医气虚体质的科学内涵。开展这项工作研究的尝试对于中医基础理论的阐释是十分有益的，可以从一个新的视角系统，全面地深化人们对中医体质的认识，推动中医事业的发展，丰富中医基础理论，开创中医药研究的新领域而促进中医药现代化进程。

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