银翘双解滴丸质量标准研究之方法与结果
1 黄芩的TLC鉴别取本品4g，加蒸馏水20ml，超声提取20min，乙酸乙酯萃取2次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，加入2 ml甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液lOp~l，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯一丁酮一甲酸一水(5：3：l：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2连翘的TLC鉴别取连翘对照药材0．5g，加甲醇10ml，置水浴上加热回流20min，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VI B)试验，吸取鉴别2．1项下的供试品溶液及对照药材溶液5～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿一甲醇(5：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105qC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3金银花的TLC鉴别取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005版一部附录VI B)试验，吸取鉴别2．1项下供试品溶液和对照品溶液各5～10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯一甲酸一水(14：5：5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
4连翘苷的含量测定
4．1 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Kromasil—C18，5urn)；流动相：乙腈一水(23：77)；检测波长：277nm；柱温：室温；流速：1．0ml·rain～；理论塔板数按连翘苷峰计算应不低于3000。
4．2对照品溶液的制备精密称取连翘苷对照品适量，加甲醇制成每lml含0．1mg的溶液，即得。
4．3供试品溶液的制备取本品20丸，研细，取约2．5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，精密称定，超声处理30rain，再称定重量，用甲醇补足减失重量，过滤，精密量取续滤液5ml，加中性氧化铝0．5g拌匀，蒸干，上中性氧化铝(100—120目，1g，内径1．0～1．5era)柱，用70％甲醇80ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用甲醇溶解，定量转移至5ml容量瓶中，并稀释至刻度；摇匀，用微孔滤膜滤过，弃去初滤液，收集续滤液，即得。
4．4标准曲线制备分别精密吸取浓度为97．6μg·m1的连翘苷对照品溶液2．0、4．O、6．0、8．0、10．0ml，置于10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，吸取10ul，分别进样，按色谱条件测定，以峰面积对浓度计算回归方程为A=498859．63C+19809．20，相关系数r=0．9998，结果表明，在0．1952一O．9760ug范围内线性关系良好。
4．5精密度试验吸取同一供试品溶液，依法分别重复进样6次，测其峰面积，连翘苷供试品溶液6次测定的峰面积平均值为305391，RSD为2．0282％；结果表明精密度良好，仪器性能良好。
4．6稳定性试验精密吸取供试品溶液10pJ，每隔lh进样1次，考察了6h，结果：供试品中连翘苷峰面积平均为303830，RSD为3．30％，表明连翘苷放置6h基本稳定。
4．7重复性试验取同1批样品6份，按2．4．3项下供试品制备及色谱条件，进行提取，制备，测定。同批样品6次测定的结果：连翘苷平均含量为1．15 mg。g～，，RSD为2．03％，说明方法重现性良好。
4．8 回收率试验取已知含量的同一批样品6份，每份约1．3g，分别加入0．992mg·ml的对照品溶液1．5ml，按2．4．3下方法提取测定含量，计算回收率。连翘苷的平均回收率为103．47％，RSD为2．29％。
4．9 阴性试验取对照品溶液、供试品溶液与空白溶液(处方中不含连翘)，分别采用上述色谱条件，进行测定。样品与对照品在同一保留时间有相同的波峰出现，而空白溶液则无相应的峰，证明空白样品不干扰测定，含量测定专属性强。
4．10样品的测定精密吸取对照品溶液10ul及供试品溶液10ul，分别注入高效液相色谱仪，测定，即得。在本色谱条件下连翘苷对照品的保留时间和样品中连翘苷的保留时间均约为12min。按峰面积用外标法计算含量。根据3批含量测定的结果综合考虑，暂定成品中连翘苷含量不低于0．8rag·g。
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