荧光法测定肾宝合剂中的总蒽醌含量
肾宝合剂是由淫羊藿、何首乌、川芎、红参等22味中药组成的口服制剂，有调和阴阳、温阳补肾、安神固精、扶正匿本等功效，主治阳痿、遗精、腰腿酸重、精神不振、夜尿频多畏寒怕冷及妇科经带诸证。方中制首乌具益精髓、长筋力、壮气驻颜、黑发延年之功，其主要成分蒽醌类的含量澳定方法有TLC法、HPLC法和比色法。有关文献以淫羊藿苷的含量来控制肾宝糖浆的质量，但选用其他成分来控制其质量的方法未见报道。已有研究证实用薄层色谱法能检出何首乌，因此本文首次采用荧光分光光度法测定谚成分含量，并优化其提取工艺及测定条件，进行系统方法学考察，为更好地控制肾宝合剂的质量提供一定依据。
1仪器与试药
岛津RF～5000荧光分光光度计。I<Q一5200型超声波清洗器：昆山超声仪器有限公司。BSll0S电子天平：北京赛多利斯天平有限公司。
大黄素对照品：由中国药品生物制品检定所提供，批号：110756—200110。肾宝合剂：浙江松寿堂中药有限公司，规格为每瓶200ml，批号为：20060308。所用试剂均为分析纯。2方法与结果
2．1对照品、供试品和阴性对照品溶液的制备2．1．1对照品溶液的制备精密称量大黄素对照品1．2mg，用无水乙醇定容至10ml，即得浓度为0．12mg-ml，的标准品液。
2．1．2供试品溶液的制备精密吸取肾宝合剂5ml，挥干，加8％盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，加氯仿10ml，加热回流60分钟，冷却后置分液漏斗中，用少量氯仿洗涤容器，并人分液漏斗，分取氯仿层，酸液用氯仿萃取3次，每次10ml,合并氯仿液，减压回收至干，残渣加无水乙醇溶解，定容于10ml量瓶，微孔滤膜滤过，即得供试溶液。
2·1．3阴性对照品溶液的制备精密吸取缺何首乌药材的肾宝合剂5ml，其余操作同“2．1．
2·2检测波长的确定 精密吸取大黄素对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各10μl，置2ml量瓶中，用无水乙醇溶液定容后，在300～600rim波长范围扫描，测得对照品溶液和供试品溶液的最佳激发波长为λ=440nm，最佳发射波长λ=515nm，而阴性对照品溶液和溶剂在该条件下则无荧光。故选用λ=440111n，λEM=515nm处的荧光作为测定总蒽醌的定量依据。
2．3 pH条件选择不同浓度盐酸乙醇溶液的配制：取6个25ml容量瓶，各加入3％盐酸溶液0．0，5．0，15．0，25．0，35．0，45．0μl，加无水乙醇定容后得不同浓度盐酸乙醇溶液。另取2ml容量瓶加大黄素标准品液适量，各加不同浓度的盐酸乙醇溶液至刻度，在λ=440nm，λEM=515nm处测定荧光强度。结果表明用加入3％盐酸5．ota配制盐酸乙醇溶液时，所测荧光最强。故实验中选择加入3％盐酸5．0μl配制的盐酸乙醇溶液定容后测定大黄素的荧光强度。
2．4标准曲线的制备精密吸取标准品液0．O，0．4，0．8．1．2，1．6，2．0μl，分别置2ml量瓶中，加入3％盐酸5．0ul配制的盐酸乙醇溶液定容后，摇匀，在λ=440nln，λ=515nm处测定荧光强度。以浓度C(μg)为横坐标，荧光强度F为纵坐标，求得回归方程：F=1970．
2．5稳定性试验取供试品溶液，按拟定条件分别在0．5、2．0、8、16、24小时测定荧光强度，结果RSD为1．02％。
2．6精密度试验 精密吸取对照品溶液10μl置2ml量瓶中，加入3％盐酸5．0μl配制的盐酸乙醇溶液定容后，摇匀，按拟定条件重复测定6次，结果RSD为1．33％。
2．7重现性试验
精密吸取肾宝合剂样品溶液80td置2ml量瓶中，加入3％盐酸5．0fd配制的盐酸乙醇溶液定容后，摇匀，按拟定条件重复测定5次，结果RSD为0．69％。
2．8回收率试验 精密吸取已知总蒽醌含量的肾宝合剂(浙江松寿堂)2．5ml，加已知浓度的对照品溶液适量，按供试品液的制备方法制备供试品液，按标准曲线项下方法测定总蒽醌的含量，计算回收率，结果平均回收率为98．1％，RSD为1．88％.
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