川贝母中非生物碱类成分的研究

  川贝母(FritiUaria cirrhosa D．Don)和梭砂贝母(Fritillaria delava3d Franch)作为川贝母的主要基源植物均被《中国药典》2005年版一部收载，以其干燥鳞茎入药，能清热润肺，化痰止咳”。均为百合科Lili． aceae贝母属植物，它们主要分布于我国西南部横断山区，前者生长于海拔2800-4700 m的高山灌丛或草地中，后者生长于海拔3800-5600 m的砂石地或流砂岩石缝中[1-21。由于川贝母资源奇缺，市场价格昂贵，对二者化学成分的研究并不多见。目前报道从川贝母中分离得到贝母甲素，贝母乙素。贝母辛，云贝酮，垂茄次碱，50r-250tH-solanidine一3B-ol，胸苷和腺苷8个成分[3-41。从梭砂贝母中分离得到7个生物碱类成分。为了进一步寻找活性成分，本实验对川贝-母和梭砂贝母的化学成分进行了系统研究。从川贝母石油醚部位和正丁醇部位共分离得到12个非生物碱类成分。通过理化性质和波谱数据鉴定其结构，分别为β一谷甾醇(βsitosterol，1)，E一肉桂酸(E-cin— namic acid，2)，单棕榈酸甘油酯(2-monopalmitin，3)，胡萝卜苷(daucosterol，4)，尿嘧啶(uracil，5)，胸嘧啶(thymine，6)，胞苷(cytidine，7)，肌苷(inosine，8)，尿苷(uridine，9)，鸟苷(guanosine，10)，胸苷(thymidine，11)，腺苷(adenosine，12)。从梭砂贝母氯仿和醋酸乙酯部位共分离得到13个非生物碱类成分，分别为E一3，4，5一三甲氧基肉桂酸(E一3，4，5-trimethoxycinnam— ic acid，13)，E一对一甲氧基肉桂酸(E-p-methoxycin． namic acid，14)，E一肉桂酸’(E-cinnamic acid，2)，E一-对一羟基肉桂酸(E—p hydroxycinnamic acid，15)，E一-对一羟基肉桂酸甲酯(E—p hydroxycinnamic acid methyl ester，16)，阿魏酸(ferulic acid，17)，咖啡酸(caffeic acid，18)，l-O-feruloyldycerol(19)，β一谷甾-醇(βsitosterol，1)，胡萝卜苷(daucosterol，4)，尿嘧啶(uracil，5)，胸嘧啶(thymine，6)，腺苷(adenosine，12)。化合物2，3，5～10和13～19为首次从贝母属中分离得到，化合物1和4为首次从川贝母中分离得到，化合物1，4和12为首次从梭砂贝母中分离得到。

    一、仪器和材料

    X-5精密显微熔点测定仪(未校正)；Perkin- Elmer 341旋光测定仪：Perkin-Elmer Lambda 35

 UV／VIS紫外光谱仪；Shimadzu FT IR-8400红外光谱仪(KBr压片)；Bruker Avance DRX-400型核磁共振仪；Thermo Finnigan LCQ Advantage 00352型质谱仪；薄层色谱用硅胶GF-254，柱色谱用硅胶G均为青岛海洋化工厂产品：凝胶Sephadex LH-20是Pharmacia公司产品：所用试剂为分析纯．天津市红岩化学试剂厂生产。

    实验样品于2006年7月采自四川省甘孜藏族自治州，经中国协和医科大学中国医学科学院药用植物研究所陈士林教授鉴定为贝母属植物川贝母(Frit— illaria cirrhosa D．Don）和梭砂贝母(Fritillaria delava~i

 Franch．)的干燥鳞茎，标本(LB-06-07)和(QB-06-07)保存于深圳市中药药学及分子药理学研究重点实验室。

    二、提取和分离

    干燥的川贝母鳞茎15 kg，粉碎成粗粉，甲醇加热回流提取2次，每次2 h，合并2次提取液，减压浓缩得到浸膏720 g。将浸膏用2％稀HCl(pH 3．5)捏溶，过滤得酸液．将酸液先用石油醚萃取，得到石油醚部位(60 g)。然后用氨水调pH至10，依次用氯仿

和水饱和的正丁醇萃取，得到氯仿部位(20 g)和正丁醇部位(80 g)。

    取石油醚部位60 g经硅胶柱色谱(100—200目)，以氯仿一甲醇(100：1：1)进行梯度洗脱，得到5个流份(F～Fi-5)。将流份Fl_2(150 mg)经甲醇重结晶，得到化合物1(65 mg)。将流份F1-3(3．0 g)经硅胶柱色谱(200～300目)分离，以石油醚一醋酸乙酯(3：1)洗脱，得到化合物2(36 mg)和3(28 mg)。流份 F1-4(2．5 g)经硅胶柱色谱(200—300目)分离，以石油醚一丙酮(3：1)洗脱，得到化合物4(30 mg)。

    取正丁醇部位80 g经硅胶柱色谱(100～200目)，以氯仿一甲醇(80：1—0：100)进行梯度洗脱，得到7个流份(F：一。～E2-7)。流份F2-3(6 g)经硅胶柱色谱(200～300目)，以氯仿一甲醇(25：1)洗脱，得到化合物5(12 mg)和6(10 mg)。流份F2-4(14 g)经硅胶柱色谱(200～300目)，以氯仿一甲醇(15：1)洗脱，再经 Sephadex LH-20柱色谱纯化．甲醇洗脱．得到化合物7(7 mg)，8(8 mg)和9(8 mg)。流份F2-5(10 g)经硅胶柱色谱(200—300目)，以氯仿一甲醇(10：1)洗脱，得到化合物10(11 mg)，11(12 mg)和12(23 mg)。

    干燥的梭砂贝母鳞茎3．5 kg，粉碎成粗粉，95％乙醇加热回流提取2次，每次2 h，合并2次提取液，减压浓缩得到浸膏120 g。将浸膏混悬于水中，依次用氯仿，醋酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到氯仿部位(30 g)，醋酸乙酯部位(45 g)和正丁醇部位(35 g)。

    取氯仿部位30 g经硅胶柱色谱(100～200目)，以氯仿一甲醇(100：1—1：1)进行梯度洗脱，得到8个流份(F-一El-8)。将流份El-3(5．1 g)经硅胶柱色谱(200～300目)分离，以石油醚一醋酸乙酯(3：1)洗脱，得到化合物1(80 mg)和13(16 mg)。流份F(2．5 g)经硅胶柱色谱(200～300目)分离，以石油醚一丙酮(4：1)洗脱，得到化合物14(11 mg)和2(35 mg)。   

    醋酸乙酯部位(45g)经硅胶柱色谱(100—200 目)，以氯仿一甲醇(80：1～0：100)进行梯度洗脱，得到15个流份(F2一F2)。将流份F2-4(2．2 g)反复经 Sephadex LH-20柱色谱纯化，氯仿一甲醇(1：1)洗脱致，故确定该化合物为胡萝卜苷(daucoster01)。

    化合物5黄白色无定形粉末，mp 332～335℃。 H—NMR(400 MHz，DMSO)：10．82(1H，br s，H一3)，10．62(1H，br s，H一1)，7．16(1H，d，J=7．2 Hz，H一6)，5．28(1H，d，J=7．2 Hz，H一5)。C—NMR(100 MHz， DMSO)8：164．6(C一4)，151．5(C一2)，142．2(C一6)，100．2(C一5)。以上数据与文献f10】基本一致，故鉴定5为尿嘧啶(umcil)。

    化合物6黄白色无定形粉末，mp 326～328℃。。H—NMR(400 MHz，CD30D)：7．21(1H，s，H一6)，1．88(3H，s，5一CH3)。”C—NMR(100 MHz，CD30D)：166．2(C一4)，152．3(C一2)，137．8(C一6)，109．0(C一5)，10．6(5一CH，)。以上数据与文献[10】基本一致，故鉴定6为胸嘧啶(thvmine)。

    化合物7  白色针状结晶(甲醇)，易溶于水，mp218—220cI=。ESI—MS(m／z)：509[2M+Na】。H—NMR(400 MHz，CD30D)8：8．06(1H，d，J=7．2 Hz，H一6)，5．91(1H，d，J=7．2 Hz，H一5)，5．86(1H，d，J=2．4 Hz， H一1)，4．15(2H，m，H一2，3)，4．03(1H，m，H一4)，3．75(1H，dd，J=12．4，3．2 Hz，H一5’a)，3．89(1H，dd，J=12．4，2．4 Hz，H一5’b)。C—NMR(100 MHz，CD30D)：167．7(C一4)，158．5(C一2)，143．1(C一6)，95．8(C一5)，92．4(C一1’)，85．8(C一4’)，76．2(C一3’)，70．7(C一2’)，61．9(C一5’)。以上数据与文献【’ol基本一致，故鉴定7为胞苷(cvtidine)。

    化合物8  白色无定形粉末。UV入maDnm：208，260。。H—NMR(400 MHz，CD30D)：8．36(1H，s， H一8)，8．08(1H，s，H一2)，6．04(1H，d，J=6．0 Hz，H一1’)，4．63(1H，dd，J=5．6，4．8Hz，H一2’)，4．34(1H，t，J=4．8，3．6Hz，H一3’)，4．15(1H，dd，J=6．4，3．2 Hz，H一4’)，3．78(1H，dd，J：12．4，3．2 Hz，H一5’a)，3．87(1H， dd，J=12．4，2．8 Hz，H一5’b)。’。C—NMR(100 MHz， CD30D)8：157．2(C一6)，148．8(C一2)，147．1(C一4)，139．0(C一8)，124．1(C一5)，87．9(C一1’)，86．0(C一4’)，74．5(C一3’)，71-3(C一2’)，62．0(C一5’)。以上数据与文献【’0]基本一致，故鉴定8为肌苷(inosine)。

    化合物9  白色粉末，易溶于Me0H。。H—NMR(400 MHz，CD30D)8：8．04(1H，d，J=8．0 Hz，H一6)，5．92f1H，d，J=4．8 Hz，H一1’)，5．73(1H，d，J=8．0 Hz， H一51，4．21(1H，m，H一3’)，4．15(1H，m，H一2’)，4．03(1H， dd．J=3．2，1．6 Hz，H一4’)，3．76(1H，dd，J=12．4，3．2 Hz．H一5’a1，3．87(1H，dd，J=12．4，2．8 Hz，H一5’b)。”C— NMR(100 MHz，CD30D)6：164．8(C一4)，151．1(C一2)，141．3(C一6)，101．2(C一5)，89．3(C一1’)，84．9(C一4’)，74．3(C一3，)，69．9(C一2’)，60．9(C一5’)。以上数据与文献【10】基本一致，故鉴定9为尿苷(uridine)。

    化合物10  白色颗粒状晶体(甲醇)，mp 238—239℃。UV入max nm：208，260。IR(KBr)cm～：3432—3312    (一OH)，3120，2929，2860，1702    (C  =O)，1600。1545，1480，1345，1222，1108，1051，1025，808。’H—NMR(400 MHz，D20)8：7．99(1H，s，H一8)，5．91(。H， d，J：6．0 Hz，H一1’)，4．74(1H，t，J：5．6 Hz，H一2’)，4．42f1H，t，J=3．6 Hz，H一3’)，4．24(1H，d，J=3．2 Hz， H一4，1．3．81 f1H，dd，J=12．8，3．2 Hz，H一5’a)，3．88 f1H．dd。J=12．8，2．4 Hz，H一5’b)。”C—NMR(100

 MHz，D，O)8：158．8(C一6)，154．4(C一2)，151．8(C一4)，135．9(C一8)，118．0(C一5)，87．1(C一1’)，85．8(C一4’)，74．0(C一3，)，71．4(C一2’)，61．5(C一5’)，以上数据与文献【lo】基本一致，故鉴定10为鸟苷(guanosine)。

    化合物11  白色晶体(甲醇)，mp 130一131 ℃。。H—NMR(400 MHz，DMS0)8：11．27(1H，br s，NH)，7．68f1H，s，H一6)，6．16(1H，t，J=6．4，7．2 Hz，H一1’)，4．23flH，d，J=3．6 Hz，H一3’)，3．76(1H，m，H一4’)，3．55

 f2H．m．H一5’)，2．07(2H，dd，J=6．4，3．6 Hz，H一2’)，1．76 f3H，s．5一CH31。’。C—NMR(100 MHz，DMSO)8：163．9(C一4)，150．4(C一2)，136．2(C一6)，109．4(C一5)，87．1(C一4’)，83．7(C一1’)，70．4(C一3’)，61．2(C一5’)，39．3(C一2，)，12．1(5一CH3)。以上数据与文献基本一致，故鉴定1l为胸苷(thymidine)。

    化合物12  白色无定形粉末，mp 233—234℃，『仅11124：一60．2。(c=0．49，水)。UV入max nm：208，260。IR(KBr)cm～：3429，3330，3132，2920，2852，1666，1645，1605。1570，1475，1420，1331，1300。’H—NMR(400MHz，DMS0)8：8．18(1H，s，H一8)，7．98(1H，s，H一2)，7．16 f2H．br s，NH2)，5．72(1H，d，J=6．4 Hz，H一1’)，4．46f1H，dd，J=11．2，5．6 Hz，H一2’)，3．99(1H，d，J=2．4 Hz，H一3’1，3．82(1H，d，J=2．4 Hz，H一4’)，3．52 flH，dd．J=12．4，3．6 Hz，H一5’a)，3．38(1H，dd，J=12．4．3．2 Hz，H一5’b)。’’C—NMR(100 MHz，DMSO)8：156．0(C一6)，152．4(C一2)，148．9(C一4)，139．9(C一8)，119．2(C一5)，87．9(C—l’)，85．8(C一4’)，73．4(C一2’)，70．6(C一3，)，61．6(C一5’)。以上数据与文献‘。叫基本一致．故鉴定12为腺苷(adenosine)。

    化合物13无色针状结晶(乙酸乙酯)，mp 126～128℃。’H—NMR(400 MHz，CD30D)6：7．64(1H，d，J：16．OHz，H一7)，6．93(2H，s，H一2，6)，6．46(1H，d，J=16．0 Hz，H一81，3．89(6H，s，3，5—0CH3)，3．81(3H，s，4一OCH，)。1’C—NMR(100 MHz，CD30D)6：169．1(C一9)．153．4(C一3，5)，145．0(C一7)，139．8(C一4)，130．3(C一1)，117．3(C一8)，105．3(C一2，6)，59．8(4一OCH3)，55-3(3，5—0CH3)。以上数据与文献报道Ⅲ’的一致，故鉴定13为E一3，4，5一三甲氧基肉桂酸(E一3，4，5一 trimethoxycinnamic acid)。

    化合物14  无色针状结晶(丙酮)，mp 170—174℃。H—NMR(400 MHz，Acetone—d6)8：7．66(1H，d， J：16．O Hz，H一7)，7．64(2H，dd，J=8．8，2．O Hz，H一2．6），7．01(2H，dd，J=8．8，12．0 Hz，H一3，5)，6．41(1H， d，J：16．0 Hz，H一8)，3．86(3H，s，一0CH3)。”C—NMR(100 MHz，Acetone—d6)：167．4(C一9)，161．6(C一4)，144．3(C一7)，129．8(C一2，6)，127．2(C一1)，115．8(C一8)．114．3(C一3，5)，54．9(一OCH3)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定14为E一对一甲氧基肉桂酸(E— p—methoxycinnamic acid)。

    化合物15  淡黄色针晶(甲醇)，mp 210—213℃。’H—NMR(400 MHz，Acetone—d6)：7．50(1H，d， J：16．0 Hz，H一7)，7．43(2H，d，J=8．4 Hz，H一2，6)，6．77f2H，d，J=8．4 Hz，H一3，5)，6．22(1H，d，J=16．0  Hz．H一81。l’C—NMR(100 MHz，Acetone—d6)：167．3(C一9)，159．6(C一4)，144．7(C一7)，130．0(C一2，6)，126．2(C一1)，115．8(C一3，5)，114．9(C一8)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定15为E一对一羟基肉桂酸(E_p—hydIloxycinnamic acid)。

    化合物16  黄白色针晶(甲醇)，mp 135—137cI=。H—NMR(400 MHz，CDCl3)：7．66(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．42(2H，d，J=8．0 Hz，H一2，6)，6．87(2H，d，J=8．0 Hz，H一3，5)，6-31(1H，d，J=16．0 Hz， H一8)，3．80(3H，s，9—0CH3)。”C—NMR(100 MHz， CDCl3)6：168．1(C一9)，158．6(C一4)，144．9(C一7)，130．0(C一2，6)，126．6(C一1)，116．0(C一8)，114．7(C一-3，5)，51．7(9—0CH3)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定16为E一对一羟基肉桂酸甲酯(E p-hv． droxycinnamic acid methyl ester)。

    化合物17  黄白色针晶(甲醇)，mp 171～173℃。’H—NMR(400 MHz，CD30D)6：7．64(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．20(1H，d，J：1．6 Hz，H一2)，7．09(1H， dd，J=8．4，1．6 Hz，H一6)，6．84(1H，d，J=8．4 Hz，H一5)，6．35(1H，d，J=16．0 Hz，H一8)，3．9l  (3H，s，一 OCH3)。”C—NMR(100 MHz，CD30D)6：169．6(C一9)，149．1(C一4)，148．O(C一3)，145．5(C一7)，126．4(C一1)，122．6(C一6)，115．1(C一5)，114．5(C一8)，110．3(C一2)，55．0(一0CH。)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定17为阿魏酸(femlic acid)。

    化合物18  黄白色针晶(甲醇)，mp 195—197℃。’H—NMR(400 MHz，CD30D)8：7．58(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．08(1H，d，J=2．0 Hz，H一2)，6．98(1H， dd，J=8．O，2．O Hz，H一6)，6．83(1H，d，J=8．0 Hz，H一5)，6．29(1H，d，J=16．0 Hz，H一8)。13C—NMR(100

 MHz，CD30D)8：170．0(C一9)，148．0(C一4)，145．4(C一3)，145．3(C一7)，126．5(C—1)，121．4(C一6)，115．1(C一5)，114．6(C一8)，113．7(C一2)。以上数据与文献报道[J5]的一致，故鉴定18为咖啡酸(caffeic acid)。

    化合物19黄色粉末，mp 148～150℃。[0【]D26=±0(c=0．48，Me0H)，UV入max nm：235，326。IR(KBr) cm～：3405，1695，1630，1605，1505。  ’H—NMR(400MHz，CD30D)8：7．53(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．04(1H，d，J=1．6 Hz，H一2)，6．94(1H，dd，J=8．0，1．6 Hz， H一6)，6．69(1H，d，J=8．0 Hz，H一5)，6．26(1H，d，J=16．0 Hz，H一8)，4．15(1H，dd，J=11．2，4．0 Hz，H—l'a)，4．06(1H，dd，J=11．2，6．O Hz，H一1’b)，3．78(1H，m，H一2’)，3．75(3H，s，一0CH3)，3．49(2H，dd，J=5．6，2．8 Hz， H一3’)0‘1’C—NMR(100 MHz，CD30D)8：167．8(C一9)，149．2(C一4)，148．0(C一3)145．6(C一7)，126．3(C一1)，

122．7(C一6)，115．1(C一5)，113．9(C一8)，110．4(C一2)，69．9(C一2’)，65．2(C一1’)，62．7(C一3’)。以上数据与文献报道61的一致，故鉴定19为1—0一feruloylglycerol。

    四、讨论

    百合科贝母属植物主要含有甾体生物碱类成分，对其非生物碱类成分的研究报道较为少见。本研究主要报道2005版药典收载的两种川贝母中的非生物碱类成分核苷类和酚酸类化合物。核苷类成分的药理活性近年很受关注，尤其是腺苷，其扩张冠状动脉、松弛平滑肌、镇静中枢神经、抑制血小板聚集等均有可能有临床意义。酚酸类成分有活血化淤、解热、抗炎、镇痛等多方面的生物活性。提示核苷类和酚酸类成分可能是贝母中除生物碱外的活性成分。

光谱中药 光谱 川贝母

川贝母中非生物碱类成分的研究

  川贝母(FritiUaria cirrhosa D．Don)和梭砂贝母(Fritillaria delava3d Franch)作为川贝母的主要基源植物均被《中国药典》2005年版一部收载，以其干燥鳞茎入药，能清热润肺，化痰止咳”。均为百合科Lili． aceae贝母属植物，它们主要分布于我国西南部横断山区，前者生长于海拔2800-4700 m的高山灌丛或草地中，后者生长于海拔3800-5600 m的砂石地或流砂岩石缝中[1-21。由于川贝母资源奇缺，市场价格昂贵，对二者化学成分的研究并不多见。目前报道从川贝母中分离得到贝母甲素，贝母乙素。贝母辛，云贝酮，垂茄次碱，50r-250tH-solanidine一3B-ol，胸苷和腺苷8个成分[3-41。从梭砂贝母中分离得到7个生物碱类成分。为了进一步寻找活性成分，本实验对川贝-母和梭砂贝母的化学成分进行了系统研究。从川贝母石油醚部位和正丁醇部位共分离得到12个非生物碱类成分。通过理化性质和波谱数据鉴定其结构，分别为β一谷甾醇(βsitosterol，1)，E一肉桂酸(E-cin— namic acid，2)，单棕榈酸甘油酯(2-monopalmitin，3)，胡萝卜苷(daucosterol，4)，尿嘧啶(uracil，5)，胸嘧啶(thymine，6)，胞苷(cytidine，7)，肌苷(inosine，8)，尿苷(uridine，9)，鸟苷(guanosine，10)，胸苷(thymidine，11)，腺苷(adenosine，12)。从梭砂贝母氯仿和醋酸乙酯部位共分离得到13个非生物碱类成分，分别为E一3，4，5一三甲氧基肉桂酸(E一3，4，5-trimethoxycinnam— ic acid，13)，E一对一甲氧基肉桂酸(E-p-methoxycin． namic acid，14)，E一肉桂酸’(E-cinnamic acid，2)，E一-对一羟基肉桂酸(E—p hydroxycinnamic acid，15)，E一-对一羟基肉桂酸甲酯(E—p hydroxycinnamic acid methyl ester，16)，阿魏酸(ferulic acid，17)，咖啡酸(caffeic acid，18)，l-O-feruloyldycerol(19)，β一谷甾-醇(βsitosterol，1)，胡萝卜苷(daucosterol，4)，尿嘧啶(uracil，5)，胸嘧啶(thymine，6)，腺苷(adenosine，12)。化合物2，3，5～10和13～19为首次从贝母属中分离得到，化合物1和4为首次从川贝母中分离得到，化合物1，4和12为首次从梭砂贝母中分离得到。

    一、仪器和材料

    X-5精密显微熔点测定仪(未校正)；Perkin- Elmer 341旋光测定仪：Perkin-Elmer Lambda 35

 UV／VIS紫外光谱仪；Shimadzu FT IR-8400红外光谱仪(KBr压片)；Bruker Avance DRX-400型核磁共振仪；Thermo Finnigan LCQ Advantage 00352型质谱仪；薄层色谱用硅胶GF-254，柱色谱用硅胶G均为青岛海洋化工厂产品：凝胶Sephadex LH-20是Pharmacia公司产品：所用试剂为分析纯．天津市红岩化学试剂厂生产。

    实验样品于2006年7月采自四川省甘孜藏族自治州，经中国协和医科大学中国医学科学院药用植物研究所陈士林教授鉴定为贝母属植物川贝母(Frit— illaria cirrhosa D．Don）和梭砂贝母(Fritillaria delava~i

 Franch．)的干燥鳞茎，标本(LB-06-07)和(QB-06-07)保存于深圳市中药药学及分子药理学研究重点实验室。

    二、提取和分离

    干燥的川贝母鳞茎15 kg，粉碎成粗粉，甲醇加热回流提取2次，每次2 h，合并2次提取液，减压浓缩得到浸膏720 g。将浸膏用2％稀HCl(pH 3．5)捏溶，过滤得酸液．将酸液先用石油醚萃取，得到石油醚部位(60 g)。然后用氨水调pH至10，依次用氯仿

和水饱和的正丁醇萃取，得到氯仿部位(20 g)和正丁醇部位(80 g)。

    取石油醚部位60 g经硅胶柱色谱(100—200目)，以氯仿一甲醇(100：1：1)进行梯度洗脱，得到5个流份(F～Fi-5)。将流份Fl_2(150 mg)经甲醇重结晶，得到化合物1(65 mg)。将流份F1-3(3．0 g)经硅胶柱色谱(200～300目)分离，以石油醚一醋酸乙酯(3：1)洗脱，得到化合物2(36 mg)和3(28 mg)。流份 F1-4(2．5 g)经硅胶柱色谱(200—300目)分离，以石油醚一丙酮(3：1)洗脱，得到化合物4(30 mg)。

    取正丁醇部位80 g经硅胶柱色谱(100～200目)，以氯仿一甲醇(80：1—0：100)进行梯度洗脱，得到7个流份(F：一。～E2-7)。流份F2-3(6 g)经硅胶柱色谱(200～300目)，以氯仿一甲醇(25：1)洗脱，得到化合物5(12 mg)和6(10 mg)。流份F2-4(14 g)经硅胶柱色谱(200～300目)，以氯仿一甲醇(15：1)洗脱，再经 Sephadex LH-20柱色谱纯化．甲醇洗脱．得到化合物7(7 mg)，8(8 mg)和9(8 mg)。流份F2-5(10 g)经硅胶柱色谱(200—300目)，以氯仿一甲醇(10：1)洗脱，得到化合物10(11 mg)，11(12 mg)和12(23 mg)。

    干燥的梭砂贝母鳞茎3．5 kg，粉碎成粗粉，95％乙醇加热回流提取2次，每次2 h，合并2次提取液，减压浓缩得到浸膏120 g。将浸膏混悬于水中，依次用氯仿，醋酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到氯仿部位(30 g)，醋酸乙酯部位(45 g)和正丁醇部位(35 g)。

    取氯仿部位30 g经硅胶柱色谱(100～200目)，以氯仿一甲醇(100：1—1：1)进行梯度洗脱，得到8个流份(F-一El-8)。将流份El-3(5．1 g)经硅胶柱色谱(200～300目)分离，以石油醚一醋酸乙酯(3：1)洗脱，得到化合物1(80 mg)和13(16 mg)。流份F(2．5 g)经硅胶柱色谱(200～300目)分离，以石油醚一丙酮(4：1)洗脱，得到化合物14(11 mg)和2(35 mg)。   

    醋酸乙酯部位(45g)经硅胶柱色谱(100—200 目)，以氯仿一甲醇(80：1～0：100)进行梯度洗脱，得到15个流份(F2一F2)。将流份F2-4(2．2 g)反复经 Sephadex LH-20柱色谱纯化，氯仿一甲醇(1：1)洗脱致，故确定该化合物为胡萝卜苷(daucoster01)。

    化合物5黄白色无定形粉末，mp 332～335℃。 H—NMR(400 MHz，DMSO)：10．82(1H，br s，H一3)，10．62(1H，br s，H一1)，7．16(1H，d，J=7．2 Hz，H一6)，5．28(1H，d，J=7．2 Hz，H一5)。C—NMR(100 MHz， DMSO)8：164．6(C一4)，151．5(C一2)，142．2(C一6)，100．2(C一5)。以上数据与文献f10】基本一致，故鉴定5为尿嘧啶(umcil)。

    化合物6黄白色无定形粉末，mp 326～328℃。。H—NMR(400 MHz，CD30D)：7．21(1H，s，H一6)，1．88(3H，s，5一CH3)。”C—NMR(100 MHz，CD30D)：166．2(C一4)，152．3(C一2)，137．8(C一6)，109．0(C一5)，10．6(5一CH，)。以上数据与文献[10】基本一致，故鉴定6为胸嘧啶(thvmine)。

    化合物7  白色针状结晶(甲醇)，易溶于水，mp218—220cI=。ESI—MS(m／z)：509[2M+Na】。H—NMR(400 MHz，CD30D)8：8．06(1H，d，J=7．2 Hz，H一6)，5．91(1H，d，J=7．2 Hz，H一5)，5．86(1H，d，J=2．4 Hz， H一1)，4．15(2H，m，H一2，3)，4．03(1H，m，H一4)，3．75(1H，dd，J=12．4，3．2 Hz，H一5’a)，3．89(1H，dd，J=12．4，2．4 Hz，H一5’b)。C—NMR(100 MHz，CD30D)：167．7(C一4)，158．5(C一2)，143．1(C一6)，95．8(C一5)，92．4(C一1’)，85．8(C一4’)，76．2(C一3’)，70．7(C一2’)，61．9(C一5’)。以上数据与文献【’ol基本一致，故鉴定7为胞苷(cvtidine)。

    化合物8  白色无定形粉末。UV入maDnm：208，260。。H—NMR(400 MHz，CD30D)：8．36(1H，s， H一8)，8．08(1H，s，H一2)，6．04(1H，d，J=6．0 Hz，H一1’)，4．63(1H，dd，J=5．6，4．8Hz，H一2’)，4．34(1H，t，J=4．8，3．6Hz，H一3’)，4．15(1H，dd，J=6．4，3．2 Hz，H一4’)，3．78(1H，dd，J：12．4，3．2 Hz，H一5’a)，3．87(1H， dd，J=12．4，2．8 Hz，H一5’b)。’。C—NMR(100 MHz， CD30D)8：157．2(C一6)，148．8(C一2)，147．1(C一4)，139．0(C一8)，124．1(C一5)，87．9(C一1’)，86．0(C一4’)，74．5(C一3’)，71-3(C一2’)，62．0(C一5’)。以上数据与文献【’0]基本一致，故鉴定8为肌苷(inosine)。

    化合物9  白色粉末，易溶于Me0H。。H—NMR(400 MHz，CD30D)8：8．04(1H，d，J=8．0 Hz，H一6)，5．92f1H，d，J=4．8 Hz，H一1’)，5．73(1H，d，J=8．0 Hz， H一51，4．21(1H，m，H一3’)，4．15(1H，m，H一2’)，4．03(1H， dd．J=3．2，1．6 Hz，H一4’)，3．76(1H，dd，J=12．4，3．2 Hz．H一5’a1，3．87(1H，dd，J=12．4，2．8 Hz，H一5’b)。”C— NMR(100 MHz，CD30D)6：164．8(C一4)，151．1(C一2)，141．3(C一6)，101．2(C一5)，89．3(C一1’)，84．9(C一4’)，74．3(C一3，)，69．9(C一2’)，60．9(C一5’)。以上数据与文献【10】基本一致，故鉴定9为尿苷(uridine)。

    化合物10  白色颗粒状晶体(甲醇)，mp 238—239℃。UV入max nm：208，260。IR(KBr)cm～：3432—3312    (一OH)，3120，2929，2860，1702    (C  =O)，1600。1545，1480，1345，1222，1108，1051，1025，808。’H—NMR(400 MHz，D20)8：7．99(1H，s，H一8)，5．91(。H， d，J：6．0 Hz，H一1’)，4．74(1H，t，J：5．6 Hz，H一2’)，4．42f1H，t，J=3．6 Hz，H一3’)，4．24(1H，d，J=3．2 Hz， H一4，1．3．81 f1H，dd，J=12．8，3．2 Hz，H一5’a)，3．88 f1H．dd。J=12．8，2．4 Hz，H一5’b)。”C—NMR(100

 MHz，D，O)8：158．8(C一6)，154．4(C一2)，151．8(C一4)，135．9(C一8)，118．0(C一5)，87．1(C一1’)，85．8(C一4’)，74．0(C一3，)，71．4(C一2’)，61．5(C一5’)，以上数据与文献【lo】基本一致，故鉴定10为鸟苷(guanosine)。

    化合物11  白色晶体(甲醇)，mp 130一131 ℃。。H—NMR(400 MHz，DMS0)8：11．27(1H，br s，NH)，7．68f1H，s，H一6)，6．16(1H，t，J=6．4，7．2 Hz，H一1’)，4．23flH，d，J=3．6 Hz，H一3’)，3．76(1H，m，H一4’)，3．55

 f2H．m．H一5’)，2．07(2H，dd，J=6．4，3．6 Hz，H一2’)，1．76 f3H，s．5一CH31。’。C—NMR(100 MHz，DMSO)8：163．9(C一4)，150．4(C一2)，136．2(C一6)，109．4(C一5)，87．1(C一4’)，83．7(C一1’)，70．4(C一3’)，61．2(C一5’)，39．3(C一2，)，12．1(5一CH3)。以上数据与文献基本一致，故鉴定1l为胸苷(thymidine)。

    化合物12  白色无定形粉末，mp 233—234℃，『仅11124：一60．2。(c=0．49，水)。UV入max nm：208，260。IR(KBr)cm～：3429，3330，3132，2920，2852，1666，1645，1605。1570，1475，1420，1331，1300。’H—NMR(400MHz，DMS0)8：8．18(1H，s，H一8)，7．98(1H，s，H一2)，7．16 f2H．br s，NH2)，5．72(1H，d，J=6．4 Hz，H一1’)，4．46f1H，dd，J=11．2，5．6 Hz，H一2’)，3．99(1H，d，J=2．4 Hz，H一3’1，3．82(1H，d，J=2．4 Hz，H一4’)，3．52 flH，dd．J=12．4，3．6 Hz，H一5’a)，3．38(1H，dd，J=12．4．3．2 Hz，H一5’b)。’’C—NMR(100 MHz，DMSO)8：156．0(C一6)，152．4(C一2)，148．9(C一4)，139．9(C一8)，119．2(C一5)，87．9(C—l’)，85．8(C一4’)，73．4(C一2’)，70．6(C一3，)，61．6(C一5’)。以上数据与文献‘。叫基本一致．故鉴定12为腺苷(adenosine)。

    化合物13无色针状结晶(乙酸乙酯)，mp 126～128℃。’H—NMR(400 MHz，CD30D)6：7．64(1H，d，J：16．OHz，H一7)，6．93(2H，s，H一2，6)，6．46(1H，d，J=16．0 Hz，H一81，3．89(6H，s，3，5—0CH3)，3．81(3H，s，4一OCH，)。1’C—NMR(100 MHz，CD30D)6：169．1(C一9)．153．4(C一3，5)，145．0(C一7)，139．8(C一4)，130．3(C一1)，117．3(C一8)，105．3(C一2，6)，59．8(4一OCH3)，55-3(3，5—0CH3)。以上数据与文献报道Ⅲ’的一致，故鉴定13为E一3，4，5一三甲氧基肉桂酸(E一3，4，5一 trimethoxycinnamic acid)。

    化合物14  无色针状结晶(丙酮)，mp 170—174℃。H—NMR(400 MHz，Acetone—d6)8：7．66(1H，d， J：16．O Hz，H一7)，7．64(2H，dd，J=8．8，2．O Hz，H一2．6），7．01(2H，dd，J=8．8，12．0 Hz，H一3，5)，6．41(1H， d，J：16．0 Hz，H一8)，3．86(3H，s，一0CH3)。”C—NMR(100 MHz，Acetone—d6)：167．4(C一9)，161．6(C一4)，144．3(C一7)，129．8(C一2，6)，127．2(C一1)，115．8(C一8)．114．3(C一3，5)，54．9(一OCH3)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定14为E一对一甲氧基肉桂酸(E— p—methoxycinnamic acid)。

    化合物15  淡黄色针晶(甲醇)，mp 210—213℃。’H—NMR(400 MHz，Acetone—d6)：7．50(1H，d， J：16．0 Hz，H一7)，7．43(2H，d，J=8．4 Hz，H一2，6)，6．77f2H，d，J=8．4 Hz，H一3，5)，6．22(1H，d，J=16．0  Hz．H一81。l’C—NMR(100 MHz，Acetone—d6)：167．3(C一9)，159．6(C一4)，144．7(C一7)，130．0(C一2，6)，126．2(C一1)，115．8(C一3，5)，114．9(C一8)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定15为E一对一羟基肉桂酸(E_p—hydIloxycinnamic acid)。

    化合物16  黄白色针晶(甲醇)，mp 135—137cI=。H—NMR(400 MHz，CDCl3)：7．66(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．42(2H，d，J=8．0 Hz，H一2，6)，6．87(2H，d，J=8．0 Hz，H一3，5)，6-31(1H，d，J=16．0 Hz， H一8)，3．80(3H，s，9—0CH3)。”C—NMR(100 MHz， CDCl3)6：168．1(C一9)，158．6(C一4)，144．9(C一7)，130．0(C一2，6)，126．6(C一1)，116．0(C一8)，114．7(C一-3，5)，51．7(9—0CH3)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定16为E一对一羟基肉桂酸甲酯(E p-hv． droxycinnamic acid methyl ester)。

    化合物17  黄白色针晶(甲醇)，mp 171～173℃。’H—NMR(400 MHz，CD30D)6：7．64(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．20(1H，d，J：1．6 Hz，H一2)，7．09(1H， dd，J=8．4，1．6 Hz，H一6)，6．84(1H，d，J=8．4 Hz，H一5)，6．35(1H，d，J=16．0 Hz，H一8)，3．9l  (3H，s，一 OCH3)。”C—NMR(100 MHz，CD30D)6：169．6(C一9)，149．1(C一4)，148．O(C一3)，145．5(C一7)，126．4(C一1)，122．6(C一6)，115．1(C一5)，114．5(C一8)，110．3(C一2)，55．0(一0CH。)。以上数据与文献报道的一致，故鉴定17为阿魏酸(femlic acid)。

    化合物18  黄白色针晶(甲醇)，mp 195—197℃。’H—NMR(400 MHz，CD30D)8：7．58(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．08(1H，d，J=2．0 Hz，H一2)，6．98(1H， dd，J=8．O，2．O Hz，H一6)，6．83(1H，d，J=8．0 Hz，H一5)，6．29(1H，d，J=16．0 Hz，H一8)。13C—NMR(100

 MHz，CD30D)8：170．0(C一9)，148．0(C一4)，145．4(C一3)，145．3(C一7)，126．5(C—1)，121．4(C一6)，115．1(C一5)，114．6(C一8)，113．7(C一2)。以上数据与文献报道[J5]的一致，故鉴定18为咖啡酸(caffeic acid)。

    化合物19黄色粉末，mp 148～150℃。[0【]D26=±0(c=0．48，Me0H)，UV入max nm：235，326。IR(KBr) cm～：3405，1695，1630，1605，1505。  ’H—NMR(400MHz，CD30D)8：7．53(1H，d，J=16．0 Hz，H一7)，7．04(1H，d，J=1．6 Hz，H一2)，6．94(1H，dd，J=8．0，1．6 Hz， H一6)，6．69(1H，d，J=8．0 Hz，H一5)，6．26(1H，d，J=16．0 Hz，H一8)，4．15(1H，dd，J=11．2，4．0 Hz，H—l'a)，4．06(1H，dd，J=11．2，6．O Hz，H一1’b)，3．78(1H，m，H一2’)，3．75(3H，s，一0CH3)，3．49(2H，dd，J=5．6，2．8 Hz， H一3’)0‘1’C—NMR(100 MHz，CD30D)8：167．8(C一9)，149．2(C一4)，148．0(C一3)145．6(C一7)，126．3(C一1)，

122．7(C一6)，115．1(C一5)，113．9(C一8)，110．4(C一2)，69．9(C一2’)，65．2(C一1’)，62．7(C一3’)。以上数据与文献报道61的一致，故鉴定19为1—0一feruloylglycerol。

    四、讨论

    百合科贝母属植物主要含有甾体生物碱类成分，对其非生物碱类成分的研究报道较为少见。本研究主要报道2005版药典收载的两种川贝母中的非生物碱类成分核苷类和酚酸类化合物。核苷类成分的药理活性近年很受关注，尤其是腺苷，其扩张冠状动脉、松弛平滑肌、镇静中枢神经、抑制血小板聚集等均有可能有临床意义。酚酸类成分有活血化淤、解热、抗炎、镇痛等多方面的生物活性。提示核苷类和酚酸类成分可能是贝母中除生物碱外的活性成分。

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