安痛藤化学成分的研究

安痛藤为葡萄科白粉藤属植物苦朗藤Cissus assamica(Laws．)的藤茎，具有祛风除湿、散淤、拔毒作用，主治风湿痹痛、跌打扭伤、痈疽肿毒。安痛藤主要分布在中南、西南及江西、福建、西藏等地。研究表明，安痛藤有较强的抗类风湿关节炎的作用。为了寻找其活性成分及新的药理活性，更好地利用丰富的植物资源，我们对其进行了化学成分的研究，从抗类风湿关节炎作用较强的醋酸乙酯部分初步分离得到5个化合物：I岩白菜素(bergenin)，Ⅱ3，3,4-三甲氧基鞣花酸(3，3,4-tri-0- methylellagicacid)，Ⅲβ一谷甾醇(β—Sitoster01)，Ⅳ没食子酸(Gallic acid)，V3，3一二甲氧基鞣花酸(3，3-di一0一methylel．1agic acid)。

1 材料与方法

1．1 光度计(美国Perkin—Elmer公司)、Mercuryplus400MHz核磁共振仪(美国varian公司)、Q—Tof mico YA019质谱仪(英国质谱公司)，硅胶均为青岛海洋化工厂产品，柱层析用聚酰胺为浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂，所用试剂均为分析纯。安痛藤采于江西赣南地区，由江西中医学院刘庆华老师采集并鉴定为葡萄科植物苦朗藤Cissus assamica(Laws．)

1．2  提取与分离取安痛藤粗粉，用80％乙醇渗漉至近无色。回收乙醇后加适量水混悬，依次用氯仿，醋酸乙酯，正丁醇萃取，各萃取部分均用真空浓缩。取醋酸乙酯萃取部分，上聚酰胺柱。用水洗至无色，浓缩得到水洗浓缩液A，聚酰胺柱再用95％乙醇洗脱至无成分流出，洗脱液浓缩，得浓缩液B。浓缩液A经硅胶柱分离，以氯仿：乙醇(5：2)洗脱得化合物I。浓缩液B，经硅胶柱分离，以氯仿：甲醇(80：20—0：1)梯度洗脱，得到结晶Ⅱ一V。 

2  结果

2．1  结晶I  无色棱柱状结晶(MeOH)，mpl34—136℃。可溶于甲醇和热水。异羟肟铁反应阳性，三氯化铁／铁氰化钾反应显蓝色。UVhmax(am)：275，220。TOF MS m／z：327．08(M—H)，TOFMSMS327．08 m／z：327．08(M—H，11％)，312．07(M—H—CH₃，70％)，234．06(M—H—CH₃一C₂H₆0₃，90％)，192．04(M—H— CH₃一C₄H₈0₄，100％)；IRvmaxcm^-1：3 389．96，3251．68(一OH)，2 951．87(一CH₃)，2 892．28(一CH₂一)，1 704．38(C=0)，1612．27，1 528．64，1 464．03(aromatic)，1 343．83，l 234．90(aromatic C-0)，861．20(C—H)；¹H—NMR(TMS，C₅D₅N，400 MHz)8：3．99(δ:3H，一OCH₃)，4．17—4．33(m，3H)，4．5(dd，=8．6，9．O，1H)，4．65(t，j=9．78，1H)，4．72(d，j=10．56，lH)，5．27(d， j=10．57，1H)，7．6(s，1H，aromatic—H);¹³C—NMR(TMS， C₅D₅N ，400 MHz)8：119．528(C1)，116．579(C2)，149．402(C3)，141．894(C4)，152．769(C5)，111．073(C6)，165．454(C7)，73．876(C1＇)，75．522(C2＇)，81．297(C3＇)，72．089(C4＇)，83．501(C5＇)，62．575(C6＇)，60．283(MeO)。以上数据与文献报道一致，结晶I与岩白菜素对照品，在TLC和HPLC多种溶剂系统中， Rf值完全一致，保留时间一致，与岩白菜素对照品混合熔点不降低，故推定为岩白菜素(bergenin)。

2．2　　结晶Ⅱ淡黄粒状结晶(氯仿+甲醇)，mp259～261℃。TOF　MS m／z：343．02(M—H)，TOF MSMS343．02 m／z：328．02(M—H—CH3，100％)，312．99(M—H—OCH，，90％)；^１H—NMR(TMS， C₅D₅N，400 MHz)δ：3．88(s，3H，4＇OCH₃)，4．17(s，3H，3＇一 OCH₃)，4．23(s，3H，3＇一OCH₃)，7．85(s，1H，aromatic—H)．8．07(s，1H，aromatic—H)；13C—NMR(TMS，C₅D₅N ，400 MHz)δ：56．604(4＇一OCH3)，61．36(3＇一OCH3)，61．592(3一OCH_３)，108．065(C-5)，111．864(C-5＇，112．883(C一4)，113．144(C一4＇，113．885(C一3)，114．333(C一3＇，141．37(C一6)，141．778(C一6＇，141．993(C一1)，142．388(C—l＇，154．34(C一2)，154．556(C一2，)，159．207(C=0)，159．307(C=O)。以上数据与文献报道基本一致，故推定为3，3＇，4＇一三甲氧基鞣花酸(3，3＇，4＇一tri一0一methylellagic acid)。

2．3  结晶Ⅲ白色针状结晶(石油醚+丙酮)，mpl39～141℃。 TOF MS m／z：397．42(M⁺H—H20)，TOF MSMS397．30 m／z：397．3l(M⁺H—H20，40％)，189．08(27％)，175．06(39％)．161．04(78％)，147．02(100％)；¹H—NMR(TMS，CDCl₃，400 MHz)δ：3．56(1H，m，H-3α)，5．35(1H，br．d，J=5．09 Hz，H-6)，O．6746(3H，t， J=7．43 Hz，H一29)，0．835(3H，d，J=10．95 Hz，H一26)，0．803(3H，d，J=10．96 Hz，H一27)，0．916(3H，d，J=6．26 Hz，H一21)．1．004(3H，s，H一18)，1．565(3H，s，H—19);¹³C—NMR(TMS． CDCl3，400MHz)8：37．216(C—1)，31．63(C一2)，71．799(C一3)．42．266(c-4)，140．726(c一5)，121．728(C一6)，31．864(C一7)．31．864(c-8)，50．077(c一9)，36．478(C一10)，21．055(C一11)，39．732(C一12)，45．779(C一13)，56．728(C一14)，24．286(C—15)，28．238(C一16)，55．998(C—17)，11．965(C一18)，19．392(C—19)，36．128(C一20)，18．999(C一21)，33．897(C一22)，29．078(C-23)，51．216(C-24)，25．977(C-25)，18．757(C一26)，19．82(C-27)，23．019(c-28)，11．844(C一29)。以上数据与文献报道基本一致，结晶Ⅲ与β—Sitosterol对照品，在TLC多种溶剂系统中的R，值完全一致，与β—Sitosterol对照品混合熔点不降低，故推定为β一谷甾醇(β—Sitoster01)。

2．4结晶Ⅳ白色粉末(乙醇)，mp242％～244℃。Molish反应阳性，茴香醛一浓硫酸反应显橙红色，NaOH试液反应显黄色',FeCl₃溶液反应显浅蓝色。取化合物Ⅳ与没食子酸对照品进行红外光谱比较，吸收峰位置与强度基本一致，故可确定化合物Ⅳ为没食子酸(Gallic acid)。

2．5 结晶V淡黄粉末(甲醇)，mp263～265℃。TOF MS m／z：329．06(M—H)，TOF MSMS329．06m／z：314．05(M—H—CH3，100％)，299．03(M—H—OCH3，80％)；。H—NMR(TMS，c；D，N，400MHz)8：8．085(s，2H，aromatic—H)，4．22(s，3H，3＇一OCH3)，4．21(s，3H，3一OCH3)；”C—NMR(TMS，C；D。N，400MHz)8：112．906(C一1，1＇，142．135(C一2，2＇，153．833(C一3，3，)，141．4(C一4，4＇，110．365(C-5，5，，113．474(C一6，6＇，159．415(C一7，70，61．331(一OCH3)。以上数据与文献报道基本一致，故推定为3，3"-二甲氧基鞣花酸(3，3＇一di—O—methyl ellagic acid)。

3  讨论

安痛藤味辛，性平，有着悠久的药用历史，在多部本草著作中均有记载。本实验所分离的岩白菜素，3，3：4＇一三甲氧基鞣花酸，3，3，_二甲氧基鞣花酸均为首次从该植物中提取得到，其中3，3，－二甲氧基鞣花酸与3，3＇4＇-三甲氧基鞣花酸为首次从该属植物中得到。文献记载，岩白菜素具有止咳祛痰，抗炎、护肝、抗溃疡、提高免疫等作用。β一谷甾醇具有降低胆固醇、止咳、抗癌及抗炎等作用，临床治疗慢性气管炎，有效率达89．3％。

本研究结果为安痛藤的药效研究提供了基础资料，为安痛藤资源进一步深度开发和合理利用提供科学依据。安痛藤其它提取部分的成分将继续进行分离鉴定，其生物活性还有待于进一步实验。

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