方法:应用紫外光谱法对国内常见的7种红曲霉制备而成的中药红曲进行鉴别研究。
结果:不同种红曲霉制备的红曲的紫外光谱及其导数光谱存在明显差异。
结论:紫外光谱法可作为红曲药材的质量评价手段之一。
红曲为一种食疗兼备的传统中药,始载元朝五代《清异录》。中国药典(1995版一部)及各地地方标准均有收载,具消食活血、健脾燥胃等功效。近年研究发现,红曲还具有降脂、降压、降糖和抑制肿瘤生长的作用[1]。但制备红曲的基原真菌种类较多,我国约有19种[2]。由于菌种、生产方法及所用大米不同等使不同产地红曲所含成分存在差异,需要提供较好的鉴别方法。中药材经一定的溶剂萃取后进行紫外光谱指纹图谱或其导数光谱指纹图谱的比较,对其进行鉴别研究已有较多报道,为中药鉴定提供了更多的信息[3、4]。我们对收集到的7种红曲霉制备的红曲,采用紫外光谱法进行了鉴别研究,结果重现性良好。
1 材料和方法
1.1 材料 菌株来源见表1。
表1 实验用红曲霉菌株及对照株的名称及来源
序号 |
菌 株 |
种 名 |
来 源 |
1 |
橙色红曲霉5015 |
Monascus aurantiacus Lee |
由汾酒酒曲分离 |
2 |
变红红曲霉5016 |
M.serorubesceus Sato |
由古田红曲米中分离 |
3 |
发白红曲霉5017 |
M.albidus Sato |
原大连科学研究所M171 |
4 |
巴克红曲霉5021 |
M.barkeri Dangerd |
由广州酒曲分离M146 |
5 |
红色红曲霉5029 |
M.ruber van Tieghem |
四川食品工业研究所3.530 |
6 |
紫红红曲霉5032 |
M.purpureus Went |
上海工业微生物研究所M212 |
7 |
烟色红曲霉5035 |
M.fuliginosus Sato |
由茅台酒厂分离 |
8 |
土曲霉9001 |
Aspergillus terreus |
轻工业部食品微生物研究所 |
1.2 仪器和试药 Varian CRAY-100型双光束分光光度仪(Varian公司),甲醇等试剂为AR。 1.3 供试液制备 将不同红曲霉菌种发酵的红曲米、土曲米和粳米于60℃烘干,粉碎,过40目筛。各取0.5g,加甲醇10ml,冷浸24h,滤过,滤液经适当稀释后待测。 1.4 测试条件 狭缝宽度2nm,扫描速度600nm/min,吸收度范围0~3.7ABS,波长范围200~800nm,当A>0.01时记录峰谷值。 1.5 测试 在上述条件下进行扫描分析,以甲醇为空白对照,测定紫外光谱,得到其0阶和1阶紫外吸收光谱图。 2 结 果 2.1 各种红曲甲醇提取液的紫外光谱见图1,峰谷值见表2。 |
|
1(9) 甲醇提取液的原阶光谱在200nm~550nm有明显的吸收峰 2(7) 具有498±1nm吸收峰 3(6) 具有270±1nm吸收峰 4(5) 无其它明显吸收峰,具250±1nm和456±1nm谷 5035 5 具有348nm和392±1nm 吸收峰,无382nm吸收峰,同时具335±1nm,350±1nm,456±1nm谷5032 5 具有382nm吸收峰,无348nm和392±1nm 吸收峰,同时具250±1nm和330±1nm谷 5021 6 具有392±1nm吸收峰,无280nm和381±1nm 吸收峰,同时具330±1nm和455±1nm谷 5016 6 具有280nm和380±1nm 吸收峰,无392±1nm 吸收峰,同时具250±1nm,350±1nm和455±1nm谷 5017 7 具有270nm吸收峰 8 具有215nm 吸收峰,无370nm 吸收峰,同时具246nm谷 5015 8 具有370nm吸收峰,无215nm 吸收峰,同时具250±1nm和455±1nm谷 9001 9 除溶剂峰外,无明显其它吸收峰和谷 5029 表2 红曲甲醇提取液的紫外光谱吸收的峰谷值(nm) |
序号 |
菌种号 |
峰 值 |
谷值 |
1 |
5015 |
272;215 |
246 |
2 |
5016 |
499;391;205 |
455;329 |
3 |
5017 |
498;381;280;202 |
456;350;249 |
4 |
5021 |
498;382;270;202 |
455;330;252 |
5 |
5029 |
201 |
无 |
6 |
5032 |
498;393;348;271 |
458;349;336 |
7 |
5035 |
498;269;203; |
456;252 |
8 |
9001 |
370;272;208 |
355;242 |
9 |
梗米甲醇液 |
202 |
无 |
2.3 各种红曲甲醇提取液的一阶导数光谱数据见表3。 表3 红曲甲醇提取液的紫外1阶导数光谱吸收的峰谷值(nm) |
序号 |
菌种号 |
峰值 |
谷值 |
1 |
5015 |
200;257 |
229;284 |
2 |
5016 |
200;222;267;351;484 |
208;229;284;440 |
3 |
5017 |
199;220;268; |
205;222;297 |
4 |
5021 |
199 |
205 |
5 |
5029 |
199 |
205 |
6 |
5032 |
231;200;215;219;268; |
195;213;217;231;309; |
|
|
347;350;483 |
348;437;515 |
7 |
5035 |
200;222;257 |
207;231;285 |
8 |
9001 |
200;221;250;363 |
212;230;284 |
9 |
梗米甲醇液 |
199;347 |
205;348 |
2.4 基于1阶导数紫外吸收光谱的检索表。 1(10) 甲醇提取液的1阶导数光谱在200nm~550nm有明显的吸收峰。 2(9) 具有220±2nm吸收峰 3(7) 具有268±1nm吸收峰 4(6) 具350±1nm和484±1nm吸收峰,并具有230±1nm谷 5 具有215nm和230±1nm 吸收峰,同时具212±1nm,217±1nm,309nm,437nm和515nm谷 5032 5 无215nm和230±1nm 吸收峰,同时具284±1nm和446nm谷 5016 6 同时具222±1nm和297±1nm谷 5017 7 同时具230±1nm和284±1nm谷 8 具有257nm 吸收峰,无250nm和363nm吸收峰 5035 8 具有250nm和363nm吸收峰,无257nm吸收峰,同时具212±1nm谷 9001 9 具有257nm吸收峰,同时具230±1nm,284±1nm谷5015 10 除溶剂峰外,无明显其它吸收峰和谷 5021或5029 3 讨 论 3.1 从红曲甲醇提取液的紫外光谱分析,可将几种红曲大致分为3类。具λ 498±1nm 和392±1nm强吸收峰的为第Ⅰ类有2个种:5016和5033,其中5032为目前商品流通中红曲的主流品种,其成分与其他种有较大的差别。5015为第Ⅱ类,无λ 498±1nm和392±1nm强吸收峰,但λ 272nm处有强吸收峰,与其所含色素以橙色为主,几乎不含红色素较为接近。第Ⅲ类有3种:5017、5021和5035;具有λ 498±1nm 和392±1nm吸收峰但较弱,而λ 270~280nm处有强吸收峰。5029未见有红色素和黄色素的吸收峰,是否与其浓度太低有关。9001不含红色素,故无λ 498±1nm吸收峰,其化学成分与真菌形态相一致。 3.2 红曲甲醇提取液的紫外光谱所含有的信息即可将几种红曲霉进行有效鉴别,但只用1阶导数光谱尚不能区分5021和5029。 3.3 紫红曲霉与同属的其它红曲霉在化学成分上存在差异,通过紫外光谱可以将红曲的品种加以鉴别。紫外光谱的特征是由化合物的结构所确定,不同品种的红曲,其峰形,峰位,导数光谱峰的振幅高度比等各不相同,可用来加以区分鉴别。反映了红曲霉属的分类与所含的酸及红曲色素的分布有关联性,可用作分类的指标来考察。 |
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