本报陕西讯 葎草为多年生缠绕草本植物,全草可以入药,其花粉是西北主
要的致敏原。西安交通大学医学院第二附属医院呼吸内科的刘昀博士等,日前采
用Trizol试剂法抽提葎草花粉总RNA,在西北地区首次成功构建出一个含有5×105
重组子的中药葎草花粉cDNA表达文库。
花粉致敏引起的变态反应病,是影响人类健康的主要因素之一。采用基因重
组技术制备变应原疫苗,并用于变态反应性疾病的诊断和治疗,是目前国内外变
态反应领域研究的热点。近年来,国外已构建了许多花粉的cDNA文库,一些主要
变应原成分及致敏蛋白组分已被克隆和纯化,如桦树花粉、豚草花粉、杉树花粉
及樱桃花粉等。有研究表明,葎草花粉是西北地区最主要的气传致敏原之一,其
空气中的花粉量计数仅次于篙属花粉。
为构建葎草花粉cDNA表达文库,深入研究葎草花粉主要变应原,刘昀等研究
人员自2004年起,将采集的葎草花粉通过分样筛选,利用Trizol法抽提葎草花粉
总RNA,纯化后用多重聚合酶链反应(PCR)法反转录合成cDNA,并进行cDNA片段
与载体的连接及体外包装,包装物经孵育后,计算其蓝白斑比例、噬菌斑数、噬
菌体滴度及库容量。在此基础上,再用PCR法进行文库重组率的测定及插入片段
大小的鉴定,从而成功地构建出葎草花粉cDNA表达文库。
刘昀等研究人员认为,研究表明,葎草花粉变应原皮内试验阳性者达70%,
血清过敏原特异性IgE阳性率达67%。该文库的成功构建,为临床对于葎草花粉过
敏引起的变态反应性疾病的诊断和治疗,以及对葎草花粉致敏蛋白组分的研究和
重组葎草花粉变应原疫苗的研制,奠定了坚实的基础。
《中国医药报》
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