溶剂法提取青蒿素的工艺
核心提示： 青蒿素(Artennuin)是从菊科植物青蒿(Artemisia an—nua L．)中提取而得，对脑型及抗氯喹恶性疟疾有特殊疗效，引起国内外的重视。目前，青蒿素的提取方法及纯化方法有很多种，笔者也曾经报道过通过多次柱层析来降低成本
青蒿素(Artennuin)是从菊科植物青蒿(Artemisia an—nua L．)中提取而得，对脑型及抗氯喹恶性疟疾有特殊疗效，引起国内外的重视。目前，青蒿素的提取方法及纯化方法有很多种，笔者也曾经报道过通过多次柱层析来降低成本的研究工艺，但同样存在回收率低，不易工艺化，生产周期长的缺点。
本实验仅采用溶剂法处理，简化了生产步骤，生产周期短；且对滤饼中夹带的少量青蒿素也用溶剂反复处理得到结晶，回收率高。
1原料及试剂
黄花蒿购自安徽亳州中药基地；青蒿素对照品购自中国药品生物制品检定所；所涉试剂除l20号汽油外其余均为国产化学纯；Agilent公司ll00系列HPLC。2 I-IPLC检测方法
ZORBAX—Cl8色谱柱(4．6mmxl50mm，5um)；流动相：乙腈：水(44：56)；检测波长：210nm；柱温：30℃；流速：1mL／min，进样体积：loμL。本方法精密称取青蒿素对照品20mg于10mL棕色容量瓶，用流动相溶解，取对照品溶液loμL注入，按上述色谱条件进行检测，按外标法测定，以峰面积计算。测得青蒿素平均回收率l00．1％(n=3)，RSD=0．3。
3实验步骤
3．1精制过程将青蒿原料粉碎至60目，然后倒入5倍青蒿总量的120号溶剂油(价格为石油醚的1／2，提取率相似，达到90％以上)。通过均匀设计的现代试验设计方法，确定了分三次提取，时间分别为4—3—3小时，每次溶剂量均为5倍量，第一次的前2个小时冷浸，后2小时加热，后面均直接加热，加热温度为50—55度，每次提取均应搅拌。提取结束后60度下回收溶剂，大约每l0Kg青蒿原材料的提取液可浓缩至600mL膏状物。在其中加入自配的混合溶剂，经过滤，得到黄色滤饼，其中夹杂有白色针状结晶，该滤饼中含有大量的青蒿素(提取率约90％，HPLC检测含量约40％)，滤液中还有约10％青蒿素，留待合并处理。在黄色滤饼中加入固体物20倍量的80～85％乙醇，和固体重量10％的粉状活性炭，加热至沸腾2min，放出过滤，滤液自然冷却结晶l2小时，过滤出结晶体，加热乙醇重结晶，可得白色针状结晶物(纯度为99．0％)。
3．2滤液中剩余10％青蒿素的处理合并多次滤液，浓缩成浸膏，取2倍量的无水乙醇与浓缩剩余物充分混合，然后缓缓加入水，加水量约为无水乙醇量的30％，上层油状物滤去，下层液体回收为浸膏，采用3．1方法处理即可得到结晶。滤饼中经HPLC检测仅含约l％青蒿素。
4小结
本工艺的精制部分，取消了繁琐的柱层析方法，改用溶剂法，首先使用混合溶剂除去提取物中大部分的杂质，得到粗品，再用乙醇进行结晶一重结晶，得到纯度很高的精品。方法简单易行，溶剂消耗量少，毒性相对较小，且60度下回收率高，生产周期短(约为60小时)，易进行工艺生产。
本实验仅采用溶剂法处理，简化了生产步骤，生产周期短；且对滤饼中夹带的少量青蒿素也用溶剂反复处理得到结晶，回收率高。
1原料及试剂
黄花蒿购自安徽亳州中药基地；青蒿素对照品购自中国药品生物制品检定所；所涉试剂除l20号汽油外其余均为国产化学纯；Agilent公司ll00系列HPLC。2 I-IPLC检测方法
ZORBAX—Cl8色谱柱(4．6mmxl50mm，5um)；流动相：乙腈：水(44：56)；检测波长：210nm；柱温：30℃；流速：1mL／min，进样体积：loμL。本方法精密称取青蒿素对照品20mg于10mL棕色容量瓶，用流动相溶解，取对照品溶液loμL注入，按上述色谱条件进行检测，按外标法测定，以峰面积计算。测得青蒿素平均回收率l00．1％(n=3)，RSD=0．3。
3实验步骤
3．1精制过程将青蒿原料粉碎至60目，然后倒入5倍青蒿总量的120号溶剂油(价格为石油醚的1／2，提取率相似，达到90％以上)。通过均匀设计的现代试验设计方法，确定了分三次提取，时间分别为4—3—3小时，每次溶剂量均为5倍量，第一次的前2个小时冷浸，后2小时加热，后面均直接加热，加热温度为50—55度，每次提取均应搅拌。提取结束后60度下回收溶剂，大约每l0Kg青蒿原材料的提取液可浓缩至600mL膏状物。在其中加入自配的混合溶剂，经过滤，得到黄色滤饼，其中夹杂有白色针状结晶，该滤饼中含有大量的青蒿素(提取率约90％，HPLC检测含量约40％)，滤液中还有约10％青蒿素，留待合并处理。在黄色滤饼中加入固体物20倍量的80～85％乙醇，和固体重量10％的粉状活性炭，加热至沸腾2min，放出过滤，滤液自然冷却结晶l2小时，过滤出结晶体，加热乙醇重结晶，可得白色针状结晶物(纯度为99．0％)。
3．2滤液中剩余10％青蒿素的处理合并多次滤液，浓缩成浸膏，取2倍量的无水乙醇与浓缩剩余物充分混合，然后缓缓加入水，加水量约为无水乙醇量的30％，上层油状物滤去，下层液体回收为浸膏，采用3．1方法处理即可得到结晶。滤饼中经HPLC检测仅含约l％青蒿素。
4小结
本工艺的精制部分，取消了繁琐的柱层析方法，改用溶剂法，首先使用混合溶剂除去提取物中大部分的杂质，得到粗品，再用乙醇进行结晶一重结晶，得到纯度很高的精品。方法简单易行，溶剂消耗量少，毒性相对较小，且60度下回收率高，生产周期短(约为60小时)，易进行工艺生产。
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